Auramin-rodamin-färgning
Kurs: MDBI
| Typ | Fluorescensfärgning för syrafasta bakterier |
| Princip | Fluorokromer binder till Mykolsyra i bakteriens cellvägg |
| Nyckelfynd | Lysande gul-orange stavar mot mörk bakgrund → Mykobakterier |
Vad är det?
- Auramin-rodamin-färgning (auramin O med rodamin) är en fluorescerande variant av syrafast färgning som används för att påvisa Mykobakterier, framför allt Mycobacterium tuberculosis.
- Den är ett alternativ till den klassiska Ziehl-Neelsen och används på sputum, vävnad och andra prover vid misstänkt Tuberkulos.
- Fluorokromerna binder till Mykolsyra i den vaxartade cellväggen och behålls trots avfärgning med syra-alkohol (syrafasthet).
Princip och utförande
- Preparatet färgas med auramin-rodamin, avfärgas med syra-alkohol och studeras i Fluorescensmikroskop.
- Syrafasta organismer lyser gul-orange mot mörk bakgrund.
- Kan granskas vid lägre förstoring än Ziehl-Neelsen → snabbare genomsökning av preparatet.
Indikation och användning
- Screening för syrafasta stavar vid misstänkt Tuberkulos och andra mykobakteriella infektioner.
- Positiva fynd bekräftas vidare med Odling och/eller PCR (t.ex. för resistensbestämning och artbestämning).
Tolkning och fallgropar
- Högre känslighet men lägre specificitet än Ziehl-Neelsen — fler fynd men fler falskt positiva.
- Kräver fluorescensmikroskop och färskt fluorokrommaterial.
- Skiljer inte Mycobacterium tuberculosis från atypiska mykobakterier — art bestäms med kompletterande metoder.
Tenta-fokus
Auramin-rodamin är den fluorescerande syrafasta färgningen: känsligare och snabbare att screena än Ziehl-Neelsen, men mindre specifik. Syrafastheten beror på Mykolsyra i cellväggen.
Klinisk pärla
Eftersom preparatet kan läsas vid lägre förstoring hinner man screena fler synfält på kortare tid — därför är fluorokromfärgning förstahandsmetod för TB-screening på många laboratorier.
Kopplingar
- Ziehl-Neelsen-färgning — klassiska alternativet
- Syrafasta bakterier — det som påvisas
- Mycobacterium tuberculosis — vanligaste målorganismen
- Tuberkulos — den kliniska frågeställningen
- Mykolsyra — molekylen bakom syrafastheten