PBS

Kurs: MDBI

Typ	Buffertlösning (laboratoriereagens)
Står för	Fosfatbuffrad saltlösning (phosphate-buffered saline)
Nyckelfynd	Isoton, pH-neutral tvätt-/spädningsbuffert
Används i	Immuncytokemi och Immunhistokemi

Vad är det?

• PBS = fosfatbuffrad saltlösning (phosphate-buffered saline) — en vattenlösning av fosfatbuffert och natriumklorid som är isoton och pH-neutral (~7,4).
• Efterliknar kroppens salthalt och pH och är skonsam mot celler och vävnad.

Sammansättning och princip

• Innehåller Natriumklorid för isotoni samt fosfatjoner som buffrar pH kring det fysiologiska.
• Är ingen fixeringsvätska — den bevarar tvärtom celler i naturligt tillstånd under hantering.

Användning

• Tvättbuffert mellan stegen i Immuncytokemi/Immunhistokemi — sköljer bort obunden primär- och sekundärantikropp och minskar bakgrund.
• Spädning av antikroppar och reagens.
• Sköljning och kortvarig förvaring av celler och vävnad.

Fallgropar

• Fel pH eller jonstyrka försämrar antikroppsbindning och färgning.
• Tillsatt konserveringsmedel (natriumazid) kan störa vissa enzymreaktioner.
• Kontaminationsrisk — bör hållas ren.

Tenta-fokus

PBS är en isoton, buffrad tvätt-/spädningslösning, inte en fixeringsvätska. Dess roll i Immuncytokemi är att skölja bort obunden antikropp mellan inkubationsstegen och därmed minska ospecifik bakgrund.

Klinisk pärla

“Skonsam koksalt med pH-stötdämpare” — PBS håller både salthalt och pH stabila, vilket är precis vad känsliga antikroppsreaktioner och levande celler behöver för att inte ta skada.

Kopplingar

• Immuncytokemi — huvudsaklig användning som tvättbuffert
• Sekundär antikropp — obunden sådan sköljs bort med PBS
• Fixering — kontrast: PBS fixerar inte, utan bevarar naturligt tillstånd
• DAB — kromogensteget som föregås av PBS-tvätt
• Vätskebaserad cytologi — buffrade lösningar i cytologisk provhantering