Primär antikropp

Kurs: MDBI

TypReagens vid immunhistokemi/immuncytokemi
FunktionBinder specifikt till målantigenet

Vad är det?

Princip/Användning

  • Steg 1 i IHC: primär antikropp binder antigenet.
  • Steg 2: sekundär antikropp (enzym-/markörkopplad) binder den primära och möjliggör visualisering via kromogen (DAB) – indirekt metod som ger signalförstärkning.

Tolkning/Fallgropar

  • Kräver adekvat fixering och ofta antigendemaskering; överfixering kan maskera epitopen.
  • Optimal koncentration viktig: för hög → ospecifik bakgrund, för låg → falskt negativ. Valideras mot positiv och negativ kontroll.

Tenta-fokus

Skilj primär (binder antigenet, omärkt i indirekt metod) från sekundär antikropp (märkt, binder den primära och förstärker signalen). Indirekt metod = signalamplifiering.

Klinisk pärla

Monoklonala primärantikroppar ger renare, mer specifik infärgning; polyklonala är känsligare men mer bakgrundsbenägna – valet påverkar tolkningen.

Kopplingar