BIOMED-2

Kurs: MDBI

Typ	Standardiserad PCR-baserad klonalitetsanalys
Användning	Påvisar klonala omlagringar av Ig- och TCR-gener
Nyckelfynd	Skiljer monoklonal (Lymfom) från polyklonal (reaktiv) lymfocytpopulation

Vad är det?

• BIOMED-2 (numera EuroClonality) är en internationellt standardiserad uppsättning PCR-primrar för att analysera klonalitet i lymfoida populationer.
• Metoden utnyttjar att varje B-cell och T-cell har en unik omlagring av sina immunglobulin- respektive T-cellsreceptorgener.
• En klonal (monoklonal) population talar för Lymfom/Leukemi, medan en polyklonal talar för en reaktiv, godartad process.

Princip och utförande

• Primrarna riktas mot konserverade regioner så att den hypervariabla, omlagrade delen (VDJ) amplifieras.
• Reaktiv vävnad → många olika omlagringslängder → jämn, spridd (“Gaussisk”) fördelning av produkter.
• Neoplastisk klon → en enda dominerande omlagring → en skarp topp/band vid en bestämd storlek.
• Analyseras med fragmentanalys (kapillärelektrofores) eller heteroduplex-gel.

Indikation och användning

• Stöd vid diagnostik av misstänkt Lymfom när morfologi och Immunhistokemi/Flödescytometri är otillräckliga.
• Fungerar på FFPE, blod och benmärg.

Tolkning och fallgropar

• Klonalitet är inte samma sak som malignitet — klonala band kan ses vid vissa reaktiva/infektiösa tillstånd, och tvärtom.
• Alltid tolkas tillsammans med klinik, morfologi och immunfenotyp.

Tenta-fokus

Monoklonalitet = stöd för lymfom, inte bevis. En dominerande Ig-/TCR-omlagring talar för neoplasi men måste tolkas i sitt kliniska och morfologiska sammanhang.

Klinisk pärla

Tänk “en topp = en klon”. En reaktiv lymfknuta ger en bred klockformad fördelning av många kloner; ett lymfom ger en enda dominerande topp.

Kopplingar

• Klonalitetsanalys — det metoden mäter
• Lymfom — den huvudsakliga frågeställningen
• Immunglobulingen — omlagras i B-celler
• T-cellsreceptorgen — omlagras i T-celler
• Flödescytometri — kompletterande metod för klonalitet