Formalinfixerad paraffininbäddad vävnad

Kurs: MDBI

Typ	Standardpreparat för histopatologi (FFPE)
Princip	Formalinfixering följt av Paraffininbäddning
Användning	Snittning, HE-färgning, IHK, molekylär analys

Vad är det?

• FFPE (formalin-fixed, paraffin-embedded) — det dominerande sättet att bevara och bädda in vävnad för mikroskopisk diagnostik.
• Vävnaden fixeras i formalin, dehydreras och bäddas in i paraffin, varefter tunna snitt kan skäras och färgas.

Princip och utförande

• Fixering: Formalin (buffrad ~4 % formaldehyd) korsbinder proteiner → stoppar Autolys och bevarar morfologin.
• Dehydrering och klarering, därefter infiltration och inbäddning i paraffin → ett hårt block som kan snittas i mikrotom.
• Snitten färgas rutinmässigt med hematoxylin-eosin; blocken kan arkiveras i årtionden.

Användning och fallgropar

• Möjliggör Immunhistokemi, In situ-hybridisering och DNA- och mutationsanalys på arkiverad vävnad — grunden för retrospektiv molekylärpatologisk diagnostik.
• Fallgropar: formalin fragmenterar nukleinsyror och kan ge sekvensartefakter (t.ex. C→T), försämrar RNA-kvaliteten och kräver avparaffinering före analys. Överfixering kan maskera antigen vid Immunhistokemi (kräver antigen-retrieval). Formalinpigment kan störa bedömningen.

Tenta-fokus

FFPE är patologins standardpreparat. Kunna kedjan: formalinfixering (korsbinder protein, stoppar autolys) → Paraffininbäddning → snittning → HE. Formalin skadar DNA/RNA → central begränsning för molekylär analys.

Klinisk pärla

Färsk eller fryst vävnad (fryssnitt) ger bättre nukleinsyrekvalitet men sämre morfologi. FFPE-arkivet gör att nya markörer och mutationsanalyser kan göras år efter provtagningen.

Kopplingar

• Formalinfixering — fixeringssteget
• Paraffininbäddning — inbäddningssteget
• Hematoxylin-eosin — rutinfärgningen på FFPE-snitt
• Immunhistokemi — vanlig tilläggsanalys på FFPE
• Molekylär patologi — mutationsanalys med formalinorsakade begränsningar