Flödescytometri
Kurs: MDBI Del: 03 Klinisk Kemi Avsnitt: 03 Blodcellsutveckling och B-celler
Vad är det?
Flödescytometri är en metod där enskilda celler i suspension passerar en laserstråle en och en och karakteriseras utifrån ljusspridning och fluorescens. Den kallas ofta FACS-analys och är standardmetoden för immunfenotypning av blod- och benmärgsceller.
Mekanism
- Framåtspritt ljus (FSC) speglar cellens storlek, sidospritt ljus (SSC) dess granularitet och kärnkomplexitet — redan detta separerar lymfocyter, monocyter och granulocyter.
- Celler inkuberas med monoklonala antikroppar märkta med olika fluorokromer; flera markörer kan analyseras samtidigt på samma cell.
- Instrumentet mäter tiotusentals celler per prov, vilket ger statistiskt robusta populationer och möjliggör detektion av små avvikande kloner.
- Samma grundprincip används i moderna automatiserade hematologianalysatorer för differentialräkning, retikulocyträkning och omogen trombocytfraktion.
Klinisk relevans & Diagnostik
- Vid leukemiutredning tas benmärg för flödescytometri och fenotypning, tillsammans med kromosomanalys — ytmarkörbestämning underlättar findiagnostik när morfologin är svårbedömd.
- Används också för lymfomklassifikation, påvisande av monoklonalitet via kappa/lambda-kvot, räkning av CD34-positiva stamceller inför skörd och kvantifiering av kvarvarande sjukdom efter behandling.
- Felkälla: metoden kräver vitala celler — hemolyserat, koagulerat, för gammalt eller fryst prov ger obrukbart resultat. Transporttid och temperatur är kritiska preanalytiska faktorer.
Kopplingar
Relaterat: FACS, Immunfenotypning, Fenotypning, Monoklonala antikroppar, Leukemi, Benmärgsprovtagning, Differentialräkning