FACS

Kurs: MDBI Del: 03 Klinisk Kemi Avsnitt: 03 Blodcellsutveckling och B-celler

Vad är det?

FACS står för fluorescence-activated cell sorting och är den fluorescensbaserade formen av flödescytometri, där celler inte bara analyseras utan också kan sorteras ut. I klinisk vardag används FACS ofta som synonym för flödescytometrisk immunfenotypning.

Mekanism

• Cellerna märks in med fluorescensmärkta monoklonala antikroppar riktade mot specifika ytmarkörer.
• Suspensionen förs i en tunn stråle förbi en laser; för varje cell registreras framåtspritt ljus (storlek), sidospritt ljus (granularitet/kärnkomplexitet) och fluorescens i flera kanaler samtidigt.
• I sorterande instrument laddas droppar med enskilda celler elektriskt och avlänkas i ett elektriskt fält, så att en definierad population kan renframställas — t.ex. CD34-positiva stamceller inför transplantation.
• Analysen sker på enskild cellnivå, vilket gör att en liten avvikande klon kan upptäckas i en stor normal bakgrund.

Klinisk relevans & Diagnostik

• Vid leukemiutredning tas benmärg för FACS-analys och fenotypning, parallellt med kromosomanalys.
• Fenotypning = bestämning av cellernas ytmarkörer; det underlättar findiagnostik av olika leukemityper eftersom morfologiska särdrag kan vara svårbedömda.
• Typiska markörer: CD19, CD20, CD5, CD23 vid KLL; myeloida markörer vid AML.
• Preanalytisk fälla: flödescytometri kräver levande celler i suspension — provet måste vara färskt, ohemolyserat och får inte frysas; koagulerat märgaspirat är obrukbart.

Kopplingar

Relaterat: Flödescytometri, Immunfenotypning, Fenotypning, Monoklonala antikroppar, Leukemi, Kromosomanalys, Benmärgsprovtagning