CISH

Kurs: MDBI

Typ	Molekylär in situ-hybridiseringsmetod
Fullständigt	Chromogenic In Situ Hybridization (kromogen in situ-hybridisering)
Princip	DNA-prob påvisas med kromogen (färgfällning) i ljusmikroskop
Jämförelse	Ljusfältsalternativ till FISH (fluorescens)

Vad är det?

• CISH (kromogen in situ-hybridisering) påvisar specifika DNA-sekvenser i vävnadssnitt med en DNA-prob som detekteras via en kromogen enzymreaktion (t.ex. peroxidas → färgad fällning).
• Signalen ses i vanligt ljusmikroskop — till skillnad från FISH, som kräver fluorescensmikroskop.

Princip / Utförande

• Proben hybridiserar till målsekvensen; bunden prob visualiseras med enzym + kromogen som ger en synlig punkt eller fällning.
• Utförs på formalinfixerade, paraffininbäddade snitt och kan kombineras med morfologisk bedömning i samma preparat.

Indikation / Användning

• Påvisar genamplifiering och kopietal (klassiskt HER2 vid Bröstcancer) samt vissa translokationer och deletioner.
• Alternativ till FISH när man vill ha permanent preparat med samtidig morfologi.

Tolkning / Fallgropar

• Fördelar: ljusfält, signalen bleknar inte, morfologin ses samtidigt, billigare mikroskopi.
• Nackdelar: svårare att räkna många signaler och att göra multiplex (flera färger) jämfört med FISH. Besläktad metod: SISH (silver in situ-hybridisering).

Tenta-fokus

CISH = kromogen in situ-hybridisering, avläses i ljusmikroskop (till skillnad från fluorescerande FISH). Använder en märkt DNA-prob för att påvisa t.ex. genamplifiering.

Klinisk pärla

Tänk “CISH = FISH i ljusfält”. Fördelen är att man ser både genavvikelsen och vävnadsmorfologin i samma snitt, och att preparatet blir permanent.

Kopplingar

• FISH — fluorescerande motsvarighet.
• DNA-prob — hybridiseringsverktyget som används.
• In situ-hybridisering — övergripande metodfamilj.
• HER2 — klassiskt amplifieringsmål.
• Genlokus — proben riktas mot ett specifikt lokus.