Primär antikropp
Kurs: MDBI
| Typ | Reagens vid immunhistokemi/immuncytokemi |
| Funktion | Binder specifikt till målantigenet |
Vad är det?
- Den antikropp som binder direkt och specifikt till det antigen man vill påvisa i vävnad/cellprov (t.ex. TTF-1, synaptofysin, CD-markörer).
- Kan vara monoklonal (en epitop, hög specificitet) eller polyklonal (flera epitoper, hög känslighet).
Princip/Användning
- Steg 1 i IHC: primär antikropp binder antigenet.
- Steg 2: sekundär antikropp (enzym-/markörkopplad) binder den primära och möjliggör visualisering via kromogen (DAB) – indirekt metod som ger signalförstärkning.
Tolkning/Fallgropar
- Kräver adekvat fixering och ofta antigendemaskering; överfixering kan maskera epitopen.
- Optimal koncentration viktig: för hög → ospecifik bakgrund, för låg → falskt negativ. Valideras mot positiv och negativ kontroll.
Tenta-fokus
Skilj primär (binder antigenet, omärkt i indirekt metod) från sekundär antikropp (märkt, binder den primära och förstärker signalen). Indirekt metod = signalamplifiering.
Klinisk pärla
Monoklonala primärantikroppar ger renare, mer specifik infärgning; polyklonala är känsligare men mer bakgrundsbenägna – valet påverkar tolkningen.
Kopplingar
- Sekundär antikropp — nästa steg i detektionskedjan
- Immunhistokemi — huvudmetoden
- Positiv kontroll — validerar infärgningen
- Monoklonal — antikroppstyp
- TTF-1 — exempel på diagnostisk primärantikropp