Direkt immunfluorescens

Kurs: Basvetenskap 5 Moment 1

Vad är det?

  • Teknik där en vävnadsbiopsi inkuberas med fluorescensmärkta antikroppar mot IgG, IgA, IgM, C3 och fibrinogen för att visa var patientens egna immundeponeringar sitter in situ.
  • Skiljer sig från indirekt immunfluorescens, där patientens serum appliceras på ett donatorsubstrat för att påvisa cirkulerande autoantikroppar.
  • Biopsin ska skickas ofixerad, i Michels medium eller fryst – formalin förstör epitoperna.

Varför är det viktigt / Mekanism

Direkt IFIndirekt IF
ProvmaterialPatientens vävnadPatientens serum
VisarDeponerade immunkomplexCirkulerande autoantikroppar
TiterNejJa, kan följas
TransportmediumMichels medium / frystVanligt serumrör

Mönstren är diagnostiska:

MönsterDiagnos
Nätmönster (fishnet) IgG + C3 mellan keratinocyterPemfigus vulgaris, Pemfigus foliaceus
Linjärt IgG + C3 längs basalmembranetBullös pemfigoid, epidermolysis bullosa acquisita
Granulärt IgA i dermala papillerDermatitis herpetiformis (celiakiassocierad)
Linjärt IgA längs basalmembranetLinjär IgA-dermatos
Granulärt IgG + C3 längs basalmembranet (lupus band)Systemisk lupus erythematosus, diskoid lupus
Granulärt IgA i mesangiet (njure)IgA-nefropati, Henoch-Schönlein
Fibrinogen i sicksack vid dermoepidermala gränsenLichen planus

Klinisk relevans & Diagnostik

RegelVarför
Perilesionell hud vid blåsdermatosI blåsbotten är immunkomplexen nedbrutna → falskt negativt
Lesionell hud vid vaskulitDeponeringen finns i det inflammerade kärlet, biopsera inom 24–48 h
Icke-solexponerad, oengagerad hud vid SLELupus band i frisk hud stödjer systemisk sjukdom
Salt-split skinKlyver huden i lamina lucida; taket = bullös pemfigoid, botten = EBA
  • DIF på njurbiopsi är obligat vid glomerulonefrit och skiljer immunkomplexsjukdom (granulärt) från anti-GBM (linjärt) och pauci-immun ANCA-vaskulit (negativ).

Tenta-fokus

Granulärt IgA i dermala papiller = dermatitis herpetiformis. Linjärt IgA längs basalmembranet = linjär IgA-dermatos. Två helt olika sjukdomar som bara skiljs på mönstret.

Klinisk pärla

Ta två biopsier vid misstänkt blåsdermatos: en i formalin för histopatologi från blåskanten, en ofixerad från perilesionell hud för DIF.

Klinisk pärla

Ett positivt lupus band i icke-solexponerad frisk hud talar för systemisk lupus; i solexponerad hud kan det ses även hos friska.

Kopplingar

Relaterat: Pemfigus vulgaris, Akantolys, Lupus, Lichen planus, Komplementsystemet, Basvetenskap 5 Moment 1