Spädning
Kurs: MDBI Del: 03 Klinisk Kemi Avsnitt: 02 Blodstatus och Hematologiska Analyser
Vad är det?
Spädning innebär att provet blandas med en känd volym spädningsvätska innan mätning, så att analytkoncentrationen eller cellantalet hamnar inom metodens mätområde. Vid manuell cellräkning var manuell spädning ett obligatoriskt och felbenäget arbetsmoment; modern automatisk apparatur utför spädningen internt.
Mekanism
- Blod innehåller storleksordningen 10¹² erytrocyter per liter, alldeles för många för att räknas direkt i räknekammare.
- Provet späds därför i en definierad spädningsfaktor, celler räknas i en känd volym och koncentrationen räknas tillbaka.
- Varje pipetteringssteg tillför ett metodfel — både systematiskt (felkalibrerad pipett) och slumpmässigt (varierande teknik).
- Spädningsfelet multipliceras med spädningsfaktorn och blir därför proportionellt större vid kraftig spädning.
- Instrument utför spädningen med precisionsdoserande ventiler och räknar tusentals celler, vilket kraftigt förbättrar precisionen.
- Spädning används också för prov med analytkoncentrationer över metodens linjära område, exempelvis vid extremt högt LPK.
Klinisk relevans & Diagnostik
- Kompendiet anger att utvecklingen gått mot venblod med lämpligt antikoagulans framför kapillärblod, just därför att automatisk apparatur kan använda venblod utan föregående manuell spädning.
- De manuella metoderna, framför allt för cellräkning, är behäftade med relativt stora metodfel — spädningsstegen är en huvudorsak.
- Manuell metod kan ändå bli nödvändig hos spädbarn och svårstuckna patienter, vid mycket högt leukocytantal, hos patienter med köldantikroppar och vid blod från vissa dialyspatienter.
- Spädning ska skiljas från in vivo-utspädning av blodet, hemodilution, som är en fysiologisk och inte analytisk företeelse.
Kopplingar
Relaterat: Cellräkning, Metodfel, Automatiserad hematologianalys, Venprovtagning, Kapillärprovtagning, Antikoagulantia, Precision, Hemodilution