Berlinerblått
Kurs: Basvetenskap 5 Moment 2
Vad är det?
- Histokemisk färgning för att påvisa treväsigt järn (Fe³⁺) i vävnad eller benmärg. Kallas även Perls färgning eller Prussian blue.
- Reaktion: kaliumferrocyanid + Fe³⁺ i surt medium → ferriferrocyanid, ett intensivt blått olösligt komplex.
Varför är det viktigt / Mekanism
- Endast lagringsjärn färgas. Reaktionen kräver att järnet är treväsigt och löst frisättbart i surt medium – dvs järn i Hemosiderin och delvis i Ferritin. Järn som är hårt bundet i Hemoglobin, Myoglobin och cytokromer färgas inte, eftersom hemjärnet är kelaterat i porfyrinringen.
- Denna selektivitet är hela poängen: färgningen skiljer järndepåer från funktionellt järn.
- Tillämpning i benmärgsdiagnostik:
- Bedömning av järndepåer i makrofager – gyllene standard för att avgöra om det finns järnbrist, oberoende av inflammationspåverkan på ferritin.
- Påvisande av ringsideroblaster – erytroblaster med järn ansamlat i mitokondrier runt kärnan i en ring (≥5 granula som täcker ≥1/3 av kärnomkretsen). Mekanismen är att järnet transporterats in i mitokondrien men inte kunnat inkorporeras i protoporfyrin IX.
- Ringsideroblaster uppstår därför alltid vid en defekt i den mitokondriella hemsyntesen eller järnhanteringen:
- Myelodysplastiskt syndrom med ringsideroblaster (MDS-RS) – nästan alltid SF3B1-mutation, vilket ger felaktig splitsning av ABCB7 och andra mitokondriella gener. SF3B1-muterad MDS har god prognos och svarar på luspatercept.
- Sideroblastanemi, X-bunden – ALAS2-mutation (första steget i hemsyntesen), svarar ofta på Pyridoxin eftersom ALAS2 är ett B6-beroende enzym.
- Blyförgiftning – bly hämmar ALA-dehydratas och ferrokelatas.
- Alkoholism och Isoniazid (B6-antagonist), linezolid, kloramfenikol, Kopparbrist, Zinköverskott (som orsakar kopparbrist).
Klinisk relevans & Diagnostik
- Järnbrist mot funktionell järnbrist: vid inflammation stiger Ferritin som akutfasprotein och kan maskera tomma depåer. Benmärgsjärn med berlinerblått visar depåerna direkt och används när biokemin är svårtolkad – men i praktiken har Transferrinmättnad, löslig transferrinreceptor och retikulocyt-Hb i stor utsträckning ersatt benmärgsundersökning för denna fråga.
- Järnöverskott: berlinerblått i leverbiopsi graderar hemosideros och kan skilja parenkymatös deposition i hepatocyter (typiskt för Hemokromatos, HFE-medierad) från retikuloendotelial deposition i Kupfferceller (typiskt för transfusionsorsakad järnöverlast). Denna distinktion pekar direkt mot etiologin.
- Övriga användningar: påvisa hemosiderinfyllda makrofager (“hjärtsviktsceller”) i lunga vid kronisk Lungstas; hemosiderin i urinsediment vid intravasal Hemolys; blödningsålder i vävnad – hemosiderin uppträder efter några dagar och kvarstår länge, till skillnad från färsk hematoidin.
- Tolkningsfällor: formalinpigment och melanin kan förväxlas med järn vid ovan bedömning; överfärgning ger falskt intryck av depåer; avkalkning av benmärgsbiopsi i sur lösning löser ut järnet och ger falskt negativt – därför bedöms järn helst i aspirat/utstryk, inte i avkalkad biopsi.
Klinisk pärla
Att berlinerblått inte färgar hemoglobinjärn är kliniskt användbart och inte en teknisk begränsning: en patient kan ha normal hemoglobinnivå och samtidigt helt tomma järndepåer, eller svår anemi med fullpackade makrofager. Färgningen mäter förrådet, inte lönen som betalas ut.
Tenta-fokus
Berlinerblått påvisar Fe³⁺ i hemosiderin/ferritin, inte hemjärn. Ringsideroblaster = järn i mitokondrier runt kärnan och betyder defekt mitokondriell hemsyntes: kunna SF3B1-muterad MDS-RS (god prognos, luspatercept), ALAS2 (X-bunden, svarar på pyridoxin) och blyförgiftning. I leverbiopsi skiljer fördelningsmönstret hemokromatos (hepatocyter) från transfusionsjärn (Kupfferceller).
Kopplingar
Relaterat: Hemosiderin, Ferritin, Järnbristanemi, Ringsideroblast, Myelodysplastiskt syndrom, SF3B1, Hemsyntes, Hemokromatos, Talassemi, Blyförgiftning, Sideroblastanemi