Hematoxylin-eosinfärgning

Kurs: Basvetenskap 5 Moment 2

Vad är det?

• Hematoxylin–eosinfärgning (H&E) är patologins standardfärgning och den som all rutinmässig Histopatologi bygger på.
• Två färgämnen med motsatt laddning ger ett tvåfärgat kontrastbild av vävnaden.

Varför är det viktigt / Mekanism

• Hematoxylin är basiskt (positivt laddat) och binder till sura, negativt laddade strukturer – framför allt DNA och RNA. Resultatet är blåvioletta cellkärnor och blåaktig ribosomrik cytoplasma.
• Eosin är surt (negativt laddat) och binder till basiska, positivt laddade strukturer – proteiner i cytoplasma och extracellulär matrix. Resultatet är rosaröd cytoplasma, kollagen och muskel.
• Termerna som följer av detta och som används i alla PAD-svar:
  • Basofil = färgas av basiska färgämnen = blå (kärnor, RNA-rik cytoplasma).
  • Eosinofil/acidofil = färgas av sura färgämnen = rosa (proteinrik cytoplasma, keratin).
  • Hyperkromasi = onormalt mörk, kraftigt hematoxylinfärgad kärna – tecken på ökad DNA-mängd och ett malignitetskriterium.
• Vad man kan bedöma på H&E: vävnadsarkitektur, cellstorlek och form, kärn/cytoplasmakvot, Nukleoler, Mitosfrekvens, Nekros, inflammation, invasion genom Basalmembran.

Klinisk relevans & Diagnostik

• H&E kommer alltid först. Immunhistokemi och molekylär analys är komplement som besvarar frågor morfologin väckt – de ersätter den inte. En patolog som beställer IHC utan en morfologisk hypotes får ofta ett svar som inte går att tolka.
• Kompletterande specialfärgningar när H&E inte räcker:
  • PAS – glykogen, svamp, basalmembran.
  • Kongorött – amyloid (äppelgrön dubbelbrytning i polariserat ljus).
  • Berlinerblått (Perls) – järn, t.ex. ringsideroblaster och hemokromatos.
  • Ziehl–Neelsen – syrafasta bakterier (Mycobacterium tuberculosis).
  • Retikulin/Masson trikrom – fibros.
• Fryssnitt färgas också med H&E men snabbare och med sämre kvalitet – används intraoperativt för att bedöma resektionsmarginal.

Tenta-fokus

Hematoxylin är basiskt och färgar sura strukturer (kärnor) blå. Eosin är surt och färgar basiska strukturer (cytoplasma) rosa. Riktningen förväxlas ofta – tänk “hematoxylin till kärnan”.

Klinisk pärla

Att H&E fortfarande, efter drygt hundra år och all molekylär diagnostik, är förstahandsmetoden säger något viktigt: arkitektur bär information som inget enskilt molekylärt test kan ersätta. Det är därför en excisionsbiopsi slår Cytologi vid lymfomfrågeställning.

Kopplingar

Relaterat: Histopatologi, Cytologi, IHC, Hyperkromasi, Berlinerblått, Fryssnitt