VDJ-rekombination

Kurs: Basvetenskap 5 Moment 1

Vad är det?

  • VDJ-rekombination är den somatiska omlagring av gensegment som ger varje B-cell och T-cell sin unika antigenreceptor. Det är den enda process i kroppen där cellens eget DNA avsiktligt klipps sönder och sätts ihop på nytt.
  • Processen förklarar hur ett genom med cirka 20 000 gener kan generera fler än 10^11 olika receptorspecificiteter.
  • Den sker antigenoberoende i benmärgen (B-celler) respektive tymus (T-celler) — alltså innan cellen någonsin mött sitt antigen.

Varför är det viktigt / Mekanism

Rekombinationen i steg

StegHändelse
1RAG1/RAG2 känner igen rekombinationssignalsekvenser (12/23-regeln)
2RAG klipper DNA och bildar hårnålsändar
3Artemis öppnar hårnålen — asymmetriskt
4Den asymmetriska öppningen ger P-nukleotider (palindromiska)
5TdT lägger till slumpmässiga N-nukleotider utan mall
6NHEJ (Ku70/80, DNA-PKcs, ligas IV, XRCC4) fogar samman ändarna
7Resultat: en unik VDJ-exon som transkriberas till receptorns variabla del

Ordningen och de fem diversitetskällorna

KällaBidrag
Multipla V-, D- och J-segmentKombinatorisk diversitet
Slumpmässigt val av segmentKombinatorisk diversitet
Junktionell diversitet (P- och N-nukleotider)Störst bidrag — koncentrerad till CDR3
Parning av tung och lätt kedjaKombinatorisk
Somatisk hypermutationEndast B-celler, efter antigenmöte, i groddcentrum
  • Tunga kedjan först: D–J, sedan V–DJ. Ett fungerande omarrangemang ger en pre-BCR som signalerar allelisk exklusion — den andra allelen stängs av, vilket säkrar en specificitet per cell.
  • Endast den tunga kedjan (och TCR-beta) har D-segment; lätta kedjor och TCR-alfa har bara V och J.

Klinisk relevans & Diagnostik

Klinisk relevans

TillståndMekanism
SCID, T−B−NK+RAG1/RAG2-mutation — inga T- eller B-celler alls
Omenns syndromHypomorf RAG-mutation → få oligoklonala autoreaktiva T-celler → erytrodermi, hepatosplenomegali, eosinofili
Ataxia telangiectasia, NijmegenDefekt DNA-reparation → immunbrist och malignitetsrisk
Artemis-bristRadiokänslig SCID — extra känslig för strålbehandling och konditionering
TranslokationerRAG-klippet kan felaktigt foga en onkogen till en Ig-locus: t(8;14) MYC–IgH vid Burkitts lymfom, t(14;18) BCL2–IgH vid follikulärt lymfom
KlonalitetsanalysPCR mot omlagrade IgH- eller TCR-gener; en enda bandstorlek = monoklonalitet = Lymfom
MRD-uppföljningDen unika VDJ-sekvensen fungerar som klonens “fingeravtryck” vid leukemi
  • TdT som markör: uttrycks bara under pågående rekombination och är därför positiv vid ALL och lymfoblastlymfom, men negativ vid mogna B-cellslymfom som Burkitts lymfom.

Tenta-fokus

VDJ-rekombination sker före antigenmötet och drabbar både B- och T-celler; Somatisk hypermutation och Klassbyte sker efter antigenmötet via AID och endast i B-celler. Att blanda ihop dessa två system är det klassiska felet.

Klinisk pärla

De onkogena translokationerna vid lymfom är i praktiken RAG- och AID-olyckor — de sker just vid de sekvenser dessa enzym normalt arbetar med. Immunsystemets diversitet har ett inbyggt pris i form av malignitetsrisk.

Klinisk pärla

Junktionell diversitet i CDR3 ger störst bidrag till repertoaren, och CDR3 är också den loop som gör huvudkontakten med antigenet. Slumpen är alltså koncentrerad exakt där den behövs mest.

Kopplingar

Relaterat: B-cell, T-cell, TdT, Somatisk hypermutation, Klassbyte, B-cellsreceptor, T-cellsreceptor, SCID, Burkitts lymfom, Benmärg, Basvetenskap 5 Moment 1