KOH-preparat
Kurs: Basvetenskap 6
Vad är det?
- Ett snabbt direktmikroskopiskt test där provmaterial behandlas med kaliumhydroxid (KOH) 10–20 % för att påvisa Svampar.
- Används vid misstänkt Dermatofytinfektion, Candidainfektion och Pityriasis versicolor.
Princip
- KOH är en stark bas som lyserar keratin, epitelceller och cellulärt debris.
- Svamparnas cellvägg av Kitin och Glukaner är resistent mot alkalisk lys — därför står Hyfer, Pseudohyfer och Sporer kvar i ett i övrigt “rensat” preparat.
- Tillsats av Kalkofluorvitt (calcofluor white) binder kitin och fluorescerar i UV-mikroskop — ökar sensitiviteten betydligt. Bläck/Chlorazol black E kan också användas som kontrastmedel.
Utförande
- Provtagning: skrapa från lesionens aktiva randzon vid tinea, nagelmaterial från nagelbäddens proximala del vid Onykomykos, hårstrån med rot vid Tinea capitis.
- Materialet läggs på objektglas, en droppe KOH tillsätts, täckglas läggs på.
- Låt “digerera” 5–30 minuter (naglar kräver längre tid, eller försiktig uppvärmning).
- Mikroskopera med nedsatt kondensorbelysning vid 100–400x.
Tolkning
- Dermatofyt: långa, septerade, förgrenade hyfer som korsar epitelcellsgränser.
- Candida: knoppande jästceller tillsammans med Pseudohyfer.
- Malassezia furfur: korta böjda hyfer och runda sporklungor — bilden “spaghetti and meatballs”, diagnostisk för Pityriasis versicolor.
- Ett positivt fynd bekräftar svamp men artbestämmer inte — det kräver Svampodling eller PCR.
Fallgropar
- Mosaiksvamp: artefakt av lipider mellan keratinocyter som liknar hyfer — följer cellgränserna i stället för att korsa dem.
- Textilfibrer och luftbubblor misstas ofta för hyfer; fibrer är bredare och saknar septeringar.
- Falskt negativt vid dålig provtagningsteknik, vid för lite material eller om patienten redan använt Antimykotikum lokalt.
- Sensitiviteten är begränsad (ca 60–80 %) — negativt KOH utesluter inte svamp, särskilt vid onykomykos.
- KOH löser inte upp bakterier och används inte för bakteriediagnostik; vid Bakteriell vaginos används dock KOH för Snifftest (fiskaktig aminlukt), vilket är en annan tillämpning av samma reagens.
Klinisk pärla
Innan du sätter in tre månaders peroral Terbinafin mot misstänkt nagelsvamp — verifiera. Upp till hälften av “nagelsvamp” är i själva verket Psoriasis, traumatisk nageldystrofi eller Lichen planus, och du utsätter då patienten för levertoxicitet utan nytta.
Tenta-fokus
Kunna varför metoden fungerar: KOH löser keratin, kitinet i svampens cellvägg står emot. Och kunna de tre typbilderna: septerade hyfer (dermatofyt), jäst + pseudohyfer (Candida), spaghetti and meatballs (Malassezia).
Kopplingar
- Dermatofytinfektion — huvudindikationen
- Terbinafin — behandlingen som bör föregås av verifierad diagnos
- Svampodling — kompletterande metod för artbestämning
- Malassezia furfur — ger det karakteristiska mikroskopifyndet
- Kitin — molekylen som gör metoden möjlig