Svampodling

Kurs: Basvetenskap 6

Typ	Mikrobiologisk odlingsmetod
Frågeställning	Påvisa och artbestämma Jästsvamp eller Mögelsvamp
Standardmedium	Sabourauds agar med kloramfenikol och cykloheximid
Inkubation	25–30 °C (och 35–37 °C), 1–4 veckor
Kompletteras med	Direktmikroskopi, MALDI-TOF, PCR, Betaglukan
Vanligaste fynd	Candida albicans, Dermatofyter, Aspergillus fumigatus

Princip

• Svampar odlas på selektiva medier med lågt pH och tillsatt antibiotika för att hämma bakterieöverväxt.
• Sabourauds agar (glukos, pepton, pH ~5,6) är standard; cykloheximid hämmar snabbväxande saprofytmögel men även vissa patogener som Cryptococcus och Aspergillus — därför sätts alltid parallellplattor utan cykloheximid vid systemisk frågeställning.
• Identifiering sker på makromorfologi (koloniens färg, textur), mikromorfologi (konidier, hyfer) och numera i första hand MALDI-TOF-masspektrometri.

Utförande efter provtyp

Provtyp	Provtagning	Kommentar
Hud/naglar	Skrap från aktiv randzon, nagelmaterial proximalt	Kombinera alltid med direktmikroskopi i KOH
Slemhinna	Pinnprov från beläggning	Skiljer inte kolonisation från infektion
Blod	Aeroba/anaeroba flaskor + ev. svampflaska	Låg känslighet vid Candidemi (~50 %)
BAL/sputum	Bronksköljvätska	Aspergillus i sputum kan vara kontamination
Likvor	Odling + Tuschfärgning + kryptokockantigen	Vid misstänkt Kryptokockmeningit

Tolkning

• Positiv blododling med Candida ska alltid betraktas som signifikant — aldrig som kontamination — och föranleder behandling samt ögonbottenundersökning.
• Fynd av Candida albicans i sputum eller urin representerar oftast kolonisation, inte infektion.
• Dermatofytväxt tar 2–4 veckor; negativt svar tidigare utesluter inte Dermatofytos.
• Artbestämning styr terapival eftersom Candida glabrata och Candida krusei har nedsatt känslighet för Flukonazol.

Kompletterande diagnostik

• Direktmikroskopi med KOH eller calcofluor white ger svar samma dag vid hud- och nagelprov.
• Betaglukan i serum: brett svampmarkörtest (ej Cryptococcus, ej Mukormykos).
• Galaktomannan i serum/BAL vid misstänkt Invasiv aspergillos.
• PCR-baserad dermatofytdiagnostik ger svar inom dygn och har högre känslighet än odling vid Onykomykos.

Fallgropar

• Antimykotisk behandling före provtagning ger falskt negativ odling — nagelprov bör tas efter minst 2 veckors uppehåll.
• För ytligt nagelskrap missar levande svamp, som växer proximalt mot nagelbädden.
• Cykloheximidhaltiga plattor hämmar Cryptococcus och Aspergillus — fel medium ger falskt negativt vid systemisk frågeställning.
• Långsam växt gör att man aldrig ska vänta med empirisk behandling hos svårt sjuk immunsupprimerad patient.

Klinisk pärla

Behandla aldrig Onykomykos med flera månaders Terbinafin utan verifierad diagnos — mikroskopi, odling eller PCR först. Cirka hälften av alla “svampnaglar” är i själva verket nageltrauma, psoriasis eller lichen.

Tenta-fokus

Sabourauds agar = standardmedium. Candida i blododling är alltid patologiskt och kräver behandling + ögonundersökning, medan Candida i sputum nästan alltid är kolonisation. Kunna att C. glabrata och C. krusei är azolresistenta och kräver Echinocandin.

Kopplingar

• Candida albicans — vanligaste jästsvampfyndet
• Dermatofyter — orsakar hud- och nagelinfektion
• Aspergillus fumigatus — invasiv mögelsvampinfektion
• Sabourauds agar — odlingsmediet
• MALDI-TOF — modern artidentifiering
• Flukonazol — behandling styrd av artbestämning