MALDI-TOF
Kurs: Basvetenskap 6
Vad är det?
- Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization – Time Of Flight masspektrometri. Den metod som sedan 2010-talet ersatt merparten av den klassiska biokemiska artbestämningen i kliniska mikrobiologilaboratorier.
- Identifierar en bakterie eller svamp på artnivå inom minuter direkt från en koloni.
Så fungerar den
- En koloni stryks ut på en metallplatta och blandas med en matrissubstans som absorberar laserenergi.
- En laserpuls förångar och joniserar provet. Matrisen skyddar proteinerna från att sönderfalla.
- Jonerna accelereras i ett elektriskt fält och får flyga genom ett vakuumrör. Lätta joner når detektorn snabbare än tunga — flygtiden ger massan.
- Resultatet är ett spektrum av ribosomala och andra höguttryckta proteiner — ett proteinfingeravtryck som är artspecifikt.
- Spektrumet jämförs mot en databas och ger art plus ett konfidensmått.
Styrkor och begränsningar
| Styrka | Begränsning |
|---|---|
| Snabb — minuter i stället för 1–2 dygn | Kräver odlad koloni (även om direktanalys från blododlingsflaska går) |
| Billig per prov efter investeringen | Databasberoende — ovanliga arter kan saknas |
| Hög träffsäkerhet för bakterier och jäst | Skiljer dåligt närbesläktade arter, till exempel Shigella från Escherichia coli och pneumokock från viridansstreptokocker |
| Fungerar även för mykobakterier och mögel med särskild preparering | Ger ingen resistensbestämning |
Tenta-fokus
MALDI-TOF artbestämmer men säger ingenting om resistens. Den identifierar Staphylococcus aureus på minuter men avslöjar inte om isolatet är MRSA — det kräver PCR för mecA eller fenotypisk Resistensbestämning. Snabb art plus separat resistensbesked är den moderna arbetsgången.
Klinisk pärla
Kombinationen MALDI-TOF direkt från positiv blododlingsflaska plus PCR för resistensgener kan ge art och resistensmönster inom några timmar i stället för efter två dygn. Det gör det möjligt att de-eskalera bredspektrumbehandling redan samma dag — en av de mest konkreta vinsterna av modern diagnostik för antibiotikaförvaltning.
Kopplingar
Relaterat: Resistensbestämning, Odling, PCR, 16s rRNA, Blododling, mecA, Antibiotikaresistens, Modul 1 - Allmän mikrobiologi