PAS-färgning
Kurs: Basvetenskap 6
Vad är det?
- Periodic acid–Schiff-färgning: en histokemisk metod som färgar strukturer rika på kolhydrater — glykogen, glykoproteiner, mukopolysackarider och basalmembran — magentaröda.
- En av de mest använda specialfärgningarna inom histopatologi och mykologi.
Princip
- Perjodsyra oxiderar vicinala hydroxylgrupper (1,2-glykoler) i sockermolekyler och bildar fria aldehydgrupper.
- Aldehyderna reagerar därefter med Schiffs reagens (avfärgat fuksin) och återbildar ett magentafärgat komplex.
- Kärnorna kontrastfärgas oftast med hematoxylin (blå).
Utförande och kontroller
- Diastasbehandling (PAS-D): en parallell snitt behandlas med amylas som bryter ned glykogen. Material som försvinner efter diastas är glykogen; material som kvarstår är glykoprotein eller mucin.
- Vävnad fixeras helst i formalin; alkoholfixering bevarar glykogen bättre.
Kliniska tillämpningar
- Svampar: Candida, Aspergillus, Pneumocystis jirovecii (cystväggen) och dermatofyter färgas tack vare kolhydratrik cellvägg. Alternativ: Grocott/GMS-silverfärgning som ger ännu bättre kontrast.
- Njurpatologi: framhäver glomerulära basalmembran och mesangiell matrix — grundläggande vid bedömning av diabetesnefropati (förtjockat GBM, Kimmelstiel-Wilsons noduli) och membranös nefropati.
- Whipples sjukdom: PAS-positiva makrofager i lamina propria i tunntarmen — Tropheryma whipplei i fagolysosomer. Nästan patognomont fynd.
- Alfa-1-antitrypsinbrist: PAS-positiva, diastasresistenta globuli i hepatocyter (periportalt).
- Glykogeninlagringssjukdomar och glykogenrika tumörer som klarcellig njurcancer.
- Makrofager vid malakoplaki samt Alveolär proteinos (PAS-positivt alveolärt material).
Fallgropar
- PAS färgar även neutrofila granulocyters granula och slem — kan feltolkas som mikroorganismer.
- Svaga eller degenererade svampelement kan missas; negativ PAS utesluter inte svampinfektion.
- Överfixering och alkoholeffekter kan tvätta bort glykogen och ge falskt negativt resultat.
Klinisk pärla
Kombinationen PAS-positiva, diastasresistenta makrofager i tunntarmsbiopsi hos en medelålders man med artrit, malabsorption och viktnedgång är Whipples sjukdom tills motsatsen bevisats — bekräfta med PCR för Tropheryma whipplei.
Tenta-fokus
Kunna principen (perjodsyra → aldehyder → Schiffs reagens) och framför allt betydelsen av diastastestet: glykogen försvinner, mucin/glykoprotein kvarstår. Kunna de tre klassiska tillämpningarna: svamp, basalmembran i njure, Whipples sjukdom.
Kopplingar
- Whipples sjukdom — klassisk PAS-indikation
- Pneumocystis jirovecii — svampdiagnostik
- Diabetesnefropati — basalmembransbedömning
- Alfa-1-antitrypsinbrist — diastasresistenta globuli
- Histopatologi — metodens sammanhang