Nefelometri

Kurs: MDBI Del: 03 Klinisk Kemi Avsnitt: 09 Proteiner, Inflammation och M-komponent

Vad är det?

Nefelometri är en immunkemisk mätprincip som kvantiterar ett protein genom att registrera ljus som sprids i sidled av de immunkomplex som bildas när antigen och specifik antikropp reagerar. Tillsammans med Turbidimetri är det standardmetoden för kvantitering av enskilda Plasmaproteiner.

Mekanism

• Patientprovet blandas med ett antiserum riktat mot det protein som ska mätas (t.ex. anti-IgG, anti-Haptoglobin).
• Antigen och antikropp bildar partikelformiga Immunkomplex som är stora nog att sprida ljus.
• Detektorn sitter i vinkel mot ljusstrålen och mäter det spridda ljuset — till skillnad från turbidimetri, som mäter försvagningen rakt igenom kyvetten.
• Signalen är proportionell mot komplexmängden och därmed mot analytkoncentrationen; avläsning sker mot en Kalibreringskurva.
• Känsligheten kan förstärkas genom att antikropparna kopplas till latexpartiklar (Latexagglutination).

Klinisk relevans & Diagnostik

Nefelometri används rutinmässigt för Albumin, Alfa-1-antitrypsin, Orosomukoid, Haptoglobin, CRP, IgA, IgG, IgM, komplementfaktorerna och för urinproteiner vid U-Proteinfraktioner. Metoden ger de kvantitativa värden som ska sambedömas med elforesmönstret — och står för merparten av informationen, eftersom flera proteiner (t.ex. orosomukoid) inte färgas på plattan. Viktig felkälla är hook-effekten: kraftigt antigenöverskott, t.ex. vid en stor M-komponent, kan ge falskt låga värden om provet inte späds. Lipemi och grumlighet i provet stör också ljusspridningen.

Kopplingar

Relaterat: Turbidimetri, Immunkemi, Plasmaproteiner, Proteinfraktioner, Hook-effekt, Immunfixation, Latexagglutination