Turbidimetri
Kurs: MDBI Del: 03 Klinisk Kemi Avsnitt: 09 Proteiner, Inflammation och M-komponent
Vad är det?
Turbidimetri är en immunkemisk mätprincip där man utnyttjar den förändrade ljusspridning (grumling) som uppstår när antigen och antikropp reagerar och bildar immunkomplex. Metoden är lätt att automatisera och är därför arbetshästen för kvantitering av Plasmaproteiner i klinisk rutin.
Mekanism
- Ett specifikt antiserum tillsätts provet; antikropparna binder det protein som ska mätas och bildar aggregat.
- Aggregaten sprider och absorberar ljus, vilket minskar den ljusintensitet som når detektorn rakt genom kyvetten — det är denna dämpning (Absorbans/Turbiditet) som mäts.
- Skillnaden mot Nefelometri är alltså detektorns placering: turbidimetri mäter transmitterat ljus i strålens riktning, nefelometri mäter sidospritt ljus.
- Reaktionen kan läsas kinetiskt (hastighetsmätning) eller som slutpunkt, och kvantiteras mot en Kalibreringskurva.
- Eftersom mätningen sker med vanlig fotometeroptik kan analysen köras direkt på de stora kemiinstrumenten tillsammans med övriga rutinanalyser.
Klinisk relevans & Diagnostik
Turbidimetri anges i kompendiet som metod både för de åtta proteinerna i S/P-elforespaketet (Albumin, Alfa-1-antitrypsin, Orosomukoid, Haptoglobin, IgG, IgA, IgM, CRP) och för U-Proteinfraktioner. De kvantitativa värdena är den viktigaste informationskällan — elforesplattan är komplementet, eftersom många proteiner färgas dåligt eller måste överskrida en viss koncentration för att synas. Felkällor: Lipemi, Hemolys och partiklar ger falsk grumling, och kraftigt antigenöverskott kan ge falskt låga svar (Hook-effekt) — provet måste då spädas om.
Kopplingar
Relaterat: Nefelometri, Immunkemi, Plasmaproteiner, Proteinfraktioner, Turbiditet, Absorbans, Hook-effekt