RNA-polymeras

Kurs: Basvetenskap 6

TypEnzym som katalyserar Transkription — DNA till RNA
RiktningSyntetiserar 5’ till 3’, läser mallsträngen 3’ till 5’
ProkaryotEtt enzym, kärnenzym α₂ββ’ω + Sigmafaktor
EukaryotRNA-pol I (rRNA), II (mRNA), III (tRNA, 5S rRNA)
LäkemedelsmålRifampicin (bakteriellt), Amanitin (pol II), virala polymeraser

Vad är det?

  • RNA-polymeras är enzymet som avläser DNA och bygger en komplementär RNA-sträng — det första steget i genuttryck.
  • Till skillnad från DNA-polymeras behöver RNA-polymeras ingen primer och saknar i huvudsak korrekturläsning (felfrekvens ca 1 på 10⁴–10⁵).
  • Använder ribonukleotidtrifosfater (ATP, GTP, CTP, UTP) och frisätter pyrofosfat.

Prokaryot RNA-polymeras

  • Kärnenzym: α₂ββ’ω — katalytiskt aktivt men kan inte hitta rätt startpunkt.
  • Holoenzym: kärnenzym + Sigmafaktor, som känner igen promotorns −10-region (Pribnowbox, TATAAT) och −35-region.
  • Olika sigmafaktorer styr olika genprogram: σ70 för hushållsgener, σ32 vid värmechock, σ54 vid kvävebrist.
  • Terminering sker antingen Rho-oberoende (hårnålsstruktur följd av poly-U) eller Rho-beroende (helikas som drar loss transkriptet).
  • Transkription och translation sker samtidigt i cytoplasman — grunden för Operonreglering och attenuering.

Eukaryota RNA-polymeraser

PolymerasProduktLokalisationHämmas av
RNA-pol I28S, 18S, 5,8S rRNANukleolHög dos aktinomycin D
RNA-pol IImRNA, snRNA, miRNANukleoplasmaα-Amanitin (mycket känsligt)
RNA-pol IIItRNA, 5S rRNANukleoplasmaHög dos α-amanitin
  • RNA-pol II kräver generella transkriptionsfaktorer (TFIID med TBP som binder TATA-boxen, TFIIH med helikas- och kinasaktivitet).
  • CTD-svansen på pol II fosforyleras och fungerar som plattform för capping, splitsning och polyadenylering.
  • Eukaryot mRNA modifieras post-transkriptionellt: 5’-cap, splitsning, 3’-poly-A-svans.

Kliniskt och farmakologiskt

  • Rifampicin: binder β-subenheten i bakteriellt RNA-polymeras och blockerar förlängning av begynnande transkript. Selektivt för bakterier, används vid Tuberkulos och som meningokockprofylax. Resistens uppstår snabbt genom punktmutation i rpoB — därför alltid kombinationsbehandling. Kraftig CYP3A4-inducerare och färgar kroppsvätskor orange.
  • Fidaxomicin: hämmar bakteriellt RNA-polymeras, används vid Clostridioides difficile-infektion.
  • α-Amanitin från vit flugsvamp (Amanita phalloides) hämmar RNA-pol II → leverceller kan inte bilda mRNA → fulminant Leversvikt 2–4 dygn efter förtäring.
  • Virala RNA-beroende RNA-polymeraser är måltavlor för Remdesivir och molnupiravir (SARS-CoV-2), sofosbuvir (Hepatit C) och favipiravir (influensa). De saknar korrekturläsning, vilket förklarar RNA-virusens höga mutationstakt och antigena drift.
  • Omvänt transkriptas vid HIV och Hepatit B är ett RNA-beroende DNA-polymeras — hämmas av Tenofovir och lamivudin.

Klinisk pärla

Rifampicins enzyminduktion av CYP3A4 är kliniskt ödesdiger: den kan göra p-piller, Warfarin, HIV-proteashämmare och transplantatimmunsuppression verkningslösa. Kontrollera alltid interaktioner och rekommendera kompletterande preventivmedel vid rifampicinbehandling.

Tenta-fokus

Kunna koppla hämmare till rätt polymeras: rifampicin → bakteriellt RNA-polymeras (β-subenheten, rpoB), α-amanitin → eukaryot RNA-pol II, aktinomycin D → interkalerar i DNA och blockerar elongering. Kom också ihåg att RNA-polymeras saknar korrekturläsning — därför de höga mutationsfrekvenserna hos RNA-virus.

Kopplingar

  • Transkription — processen enzymet utför
  • Rifampicin — viktigaste läkemedlet riktat mot bakteriellt RNA-polymeras
  • Sigmafaktor — styr promotorigenkänning hos bakterier
  • DNA-polymeras — jämförelseenzym med korrekturläsning
  • Operon — prokaryot regleringsenhet
  • Tuberkulos — rifampicin är hörnsten i behandlingen
  • Antigen drift — konsekvens av polymerasets bristande korrekturläsning